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基因表达分析——甲基化PCR

DNA甲基化是哺乳类动物一个重要的基因外遗传信号。有研究表明,DNA甲基化与大多数肿瘤的发生相关,抑癌基因启动子CpG岛的高度甲基化可引起抑癌基因表达沉默,细胞出现无节制生长,导致肿瘤的发生。

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基因表达分析——northern blot

blot主要用于组织细胞靶基因表达水平的研究以及对同一组织细胞的不同基因间的表达水平Northern进行比较,或者对不同组织细胞间相同基因的表达水平进行比较。

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实时定量PCR

实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

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定点突变

体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具,也是我们在实验室中改造、优化基因的常用的手段。

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ORF克隆

在进行目的蛋白的表达、构建表达载体等实验时,通常需要获得一段目的基因。我们可以根据您提供的已知参考序列(NCBI上已发表),以总RNA为模板,获取您所需要的某个区域的一段基因。

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凝胶迁移实验——EMSA

凝胶迁移或电泳迁移率实验是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析,这以技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的互作用

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基因表达调控解析之利器—ChIP-qPCR

特定转录因子与已知启动子区域的结合(Direct ChIP);在已知启动子的大片段范围内寻找特定转录因子的结合位点(ChIP-Scaning);在基因组范围内搜寻特定转录因子;结合的所有启动子片断。

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启动子的克隆与系列缺失突变分析

启动子序列缺失突变分析;转录因子的活性检测;信号通路的研究;药物筛选。

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5’RACE克隆miRNA转录起始位点

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表达调控

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miRNA原位杂交

原位杂交是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基配对规则与细胞内待测的核酸复性结合,并通过探针上所标记的检测系统将所测核酸在其原有位置显示出来。

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miRNA过表达载体的构建方法

莱德尔技术使用的是以下两种方式:● pri-miRNA(含侧翼序列)的表达形式,Ⅱ型启动子载体;● pre-miRNA的表达形式,U6启动子载体。

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